زبانی رکاوٹ کو توڑنا（4）

سائیکلک پیپٹائڈ PTG-200 کی دریافت اور اخذ کرنا
PTG-200 کی دریافت

2016 میں، پروٹاگونسٹ نے IL-23R کو نشانہ بنانے والے ایک زبانی پولی پیپٹائڈ روکنے والے کے لیے ایک پیٹنٹ (WO2016011208) کا انکشاف کیا، جس میں IL-23R سے منسلک ہونے کے قابل کئی لکیری اور سائکلک پیپٹائڈ سلسلے شامل تھے۔ قابل ذکر بات یہ ہے کہ اس پیٹنٹ کے جدول 3A میں پیش کردہ ترتیبیں MDL کے ذریعے فیج ڈسپلے کے ذریعے حاصل کیے گئے ڈھانچے سے ملتے جلتے ہیں۔ درج کردہ لکیری پیپٹائڈ کی ترتیب بنیادی طور پر بنیادی ڈھانچہ پر مشتمل ہے -WQDYW- (جیسا کہ ذیل کی تصویر میں دکھایا گیا ہے)۔ ان میں سے، سب سے زیادہ طاقتور مالیکیول (SEQ ID NO.4) نے 4.1 µM کا IL-23R روک تھام کرنے والا ارتکاز حاصل کیا، جس کی ساخت MDL کے پیپٹائڈ 23.15 کے N-ٹرمینس کو ایسٹیلیٹ کر کے بنائی گئی۔
یہ بات قابل ذکر ہے کہ MDL اور Protagonist نے ایک بار 2014 میں IL-23R پیپٹائڈ پر تعاون پر بات چیت کی تھی، جس کے دوران MDL نے اپنی تحقیقی معلومات کا اشتراک کیا تھا۔ 2015 میں، دونوں جماعتوں نے رازداری کے معاہدے پر دستخط کیے، لیکن اسی سال اکتوبر میں مذاکرات ختم کر دیے گئے۔ بعد میں آنے والی قانونی دستاویزات سے پتہ چلتا ہے کہ MDL نے امریکی ڈسٹرکٹ کورٹ میں پروٹاگونسٹ کے خلاف مقدمہ دائر کیا، جس میں PTG-200 کے ذریعے پیٹنٹ کی خلاف ورزی کا الزام لگایا گیا، جس میں پیٹنٹ US 8946150 (MDL) اور US 9624268 (Protagonist) شامل تھے۔ 2018 میں، MDL کے پیٹنٹ کی خلاف ورزی کے دعوے کو مسترد کر دیا گیا تھا کیونکہ Protagonist نے ان پیپٹائڈز کو FDA سے منظور شدہ آٹو امیون بیماریوں کے لیے تیار کرنے کے لیے استعمال کیا تھا، جو محفوظ ہاربر اصول کے تحت محفوظ تھیں۔

اس مضمون کے فوکس پر واپس آتے ہوئے، پروٹاگونسٹ نے MDL کی طرف سے تجویز کردہ - WQDYW بنیادی ڈھانچہ کو بعد میں مالیکیولر ترمیمات میں برقرار رکھا، لیکن سائیکلائزیشن کی حکمت عملی میں مختلف ڈیزائن اپنائے۔ انہوں نے ایک محفوظ ڈھانچہ - CXX-WQCYW - (جیسے - CQTWQCYW -) بنانے کے لیے بنیادی ترتیب میں ایک Cys متعارف کرایا، اور اس ڈھانچے کے ارد گرد سیکڑوں پیپٹائڈز اخذ کیے، جس سے نانومولر ڈائیا گرام کی سرگرمی میں اضافہ ہوا (جیسا کہ ذیل میں دکھایا گیا ہے)۔ اس کے علاوہ، پروٹاگونسٹ نے سائیکلائزیشن کے مختلف طریقے بھی آزمائے ہیں، جن میں دو Cys سائٹس کے درمیان تھیوتھر بانڈ متعارف کرانا، اولیفین میٹاتھیسس ری ایکشن (RCM) کا استعمال، اور امائیڈ بانڈ سائیکلائزیشن کی حکمت عملیوں کو نافذ کرنا شامل ہے۔ تاہم، تجرباتی نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ پیپٹائڈس سائیکلکل بذریعہ ڈسلفائیڈ یا تھیوئتھر بانڈز عام طور پر RCM یا امائیڈ بانڈز کے ذریعے پیپٹائڈس سائیکلک سے بہتر سرگرمی کا مظاہرہ کرتے ہیں۔

PTG-200 (کمپاؤنڈ C) کا PK ڈیٹا پیٹنٹ میں ظاہر کیا گیا ہے: 20 mg/kg کی خوراک پر چوہوں کو زبانی استعمال کرنے کے بعد، مرکب بنیادی طور پر معدے کے بافتوں میں تقسیم کیا جاتا ہے، انتہائی کم نظامی نمائش کے ساتھ۔ ان میں، چھوٹی آنت کے میوکوسا کا AUC 355 μg · h/g ہے، اور بڑی آنت کے میوکوسا کا 77 μg · h/g ہے۔ تاہم، پلازما میں AUC صرف 0.3 μg · h/mL ہے، جس میں پاخانے میں 40% کی بحالی کی شرح ہے۔ یہ مرکب معدے کے مختلف رطوبتوں اور کم کرنے والے ماحول میں اچھی استحکام کی نمائش کرتا ہے: اس کی نصف زندگی نقلی آنتوں کے سیال (SIF)، نقلی معدے کے سیال (SGF) اور انسانی آنتوں کے سیال میں 24 گھنٹے سے زیادہ ہوتی ہے، اور اس کی ڈی ٹی ٹی 2 گھنٹے سے زیادہ کی نصف زندگی بھی ہوتی ہے۔ SPR تجربے کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ یہ اکیلے IL-12R 1 کا پابند نہیں ہے، لیکن بالترتیب 2.42 nM اور 2.56 nM کی مضبوط وابستگی اور KD قدروں کے ساتھ ظاہر کردہ IL-23R اور IL-12R 1/IL-23R co کی سطح سے منسلک ہو سکتا ہے۔

PTG-200 کا مشتق

2017 میں، Protagonist نے IL-23R peptide inhibitors (WO2017011820) کے لیے اپنا دوسرا پیٹنٹ شائع کیا۔ یہ پیٹنٹ پہلے پیٹنٹ کے ڈھانچے کو 227 اخذ کردہ ترتیب (SEQ ID NO.1030-1256) تک بڑھاتا ہے اور سائکلک پیپٹائڈ پر ساختی اکائیوں کو متعارف کراتا ہے جو vivo میں نصف زندگی کو طول دے سکتا ہے (جیسا کہ درج ذیل تصویر میں دکھایا گیا ہے)۔ فارماکوکینیٹک مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ چوہوں کو 10mg/kg Peptide NO.1185 کے زبانی استعمال کے بعد، پلازما میں ارتکاز چھوٹی آنت اور بڑی آنت کے نمونوں کے مقابلے میں بہت کم ہوتا ہے، اور 24 گھنٹے کے بعد پاخانے میں صحت یابی کی شرح 20% تک پہنچ جاتی ہے۔ حفاظتی تشخیص سے پتہ چلتا ہے کہ پیپٹائڈ NO.1185 نے 44 اہداف پر روکے اثرات ظاہر نہیں کیے جن میں G پروٹین کے ساتھ مل کر ریسیپٹرز، ٹرانسپورٹرز، اور آئن چینلز 10 µ M پر ہیں۔

اس کے بعد، Protagonist نے PTG-200 یا Peptide NO.1185 ڈھانچے پر مبنی کئی مشتق پیٹنٹ شائع کیے، جس نے مختلف باقیات کی جگہوں پر ساختی اخذات کے ذریعے سرگرمی اور استحکام کو مزید بہتر بنایا۔ متعلقہ ترمیمات کی تفصیلات پیٹنٹ WO2018136646، WO2020014646، WO2021007433، اور WO2021146458 میں مل سکتی ہیں۔ اس کے علاوہ، پروٹاگونسٹ نے ایک پیٹنٹ (WO2018022937) کے لیے بھی درخواست دی ہے جس میں 34 امینو ایسڈز پر مشتمل سائکلک پیپٹائڈ IL-23R روکنے والے کا احاطہ کیا گیا ہے، جس پر اس مضمون میں مزید بات نہیں کی جائے گی۔